胶体金法中T线和C线的工作原理基于免疫竞争结合机制，具体如下：
一、T线（检测线）原理
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抗体结合机制
T线区域固定有针对目标抗原（如毒品代谢物、金霉素等）的特异性抗体（如单克隆抗体）。当待测样本中的目标物质浓度达到一定水平时，其分子会与抗体结合，阻止目标物质与固定抗体结合。
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显色反应
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若样本中无目标物质，目标抗体与T线上的固定抗体结合，形成可见的沉淀色带（通常为红色）。
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若样本中存在目标物质（如吗啡浓度≥300ng/ml），目标物质与抗体结合后占据抗体结合位点，导致T线无法与检测区（T线区）的抗原结合，从而出现无色或浅色线条。
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二、C线（控制线）原理
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阳性对照
C线区域固定有针对检测用抗原（如CAP-BSA）的抗体。无论样本中目标物质浓度如何，C线都会与固定抗体结合，形成稳定的红色线条，作为实验的阳性对照。
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结果验证
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若T线出现预期颜色变化（如与C线相近或更浅），则说明检测有效。
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若T线无颜色变化，而C线有颜色，则提示实验失败，可能是样本处理不当或抗体失效。
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三、其他关键点
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灵敏度与特异性 ：通过调整抗体浓度、固定抗原量等参数，可优化检测灵敏度和特异性。
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应用场景 ：T线用于检测目标物质的存在与否，C线用于验证检测体系的可靠性。
这种竞争结合原理是免疫层析试纸条的核心，广泛应用于毒品检测、药物残留分析、环境监测等领域。