DNA的粗提取与鉴定

DNA的粗提取与鉴定是生物学实验中的一个基础课题,旨在通过简单的实验方法提取和鉴定DNA。以下将详细介绍DNA粗提取与鉴定的实验原理、步骤、结果分析及注意事项。

实验原理

DNA的溶解度

DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的变化而变化。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低,利用这一原理可以使DNA析出。DNA的溶解度特性是粗提取的关键,通过调节NaCl浓度可以实现DNA的析出和纯化。

DNA与细胞内其他成分的分离

DNA不溶于95%的酒精溶液,但细胞中的某些物质可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。通过酒精沉淀可以有效地将DNA与细胞内其他成分分离,提高DNA的纯度。

DNA的鉴定

DNA遇二苯胺​(沸水浴)会染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二苯胺染色是DNA鉴定的一种简便有效的方法,通过观察颜色变化可以确认DNA的存在。

实验步骤

制备鸡血细胞液

将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL置于500mL烧杯中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,静置于冰箱内一天或离心2分钟,用吸管吸去上清液。
制备鸡血细胞液是实验的第一步,确保血液与抗凝剂充分混合,防止凝血,为后续提取DNA奠定基础。

提取细胞核物质

取制备好的鸡血细胞液5mL至50mL烧杯中,加入蒸馏水20mL,用玻璃棒充分搅拌5分钟,使血细胞加速破裂,然后过滤至500mL烧杯中。通过搅拌和过滤,细胞内的DNA和其他成分被分离,收集到滤液中。

溶解DNA

2mol/L的NaCl溶液40mL加入到滤液中,摇动烧杯使其混合均匀,DNA在溶液中呈溶解状态。高浓度的NaCl溶液使DNA溶解,去除细胞膜和核膜等杂质。

析出DNA

沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,至白色丝状粘稠物不再增加时停止加水。通过逐渐降低NaCl浓度,DNA析出形成粘稠物,这一步骤是实验的关键。

过滤和再溶解

用多层纱布过滤步骤3中的溶液至500mL的烧杯中,含DNA的粘稠物被留在纱布上。将粘稠物再溶解于2mol/L的NaCl溶液中,过滤去除杂质。过滤进一步去除杂质,再溶解使DNA纯化,准备后续鉴定。

DNA的鉴定

取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解,然后加入4mL的二苯胺试剂,沸水浴加热5分钟,观察颜色变化。
通过二苯胺染色鉴定DNA,蓝色溶液表明提取成功。

实验结果分析

颜色变化

在沸水浴中加热后,含有DNA的试管溶液变成蓝色,而对照试管溶液不变色。这表明提取出的物质是DNA。颜色变化是鉴定DNA的直接证据,蓝色溶液表明DNA的存在。

纯度分析

通过超微量紫外可见分光光度计检测,纯化后的DNA其OD260/OD280比值应在1.8左右,​OD260/OD230比值应在2.0左右,表明DNA纯度高。
纯度分析可以进一步确认DNA的提取效果,高纯度DNA适合用于后续的基因工程实验。

实验注意事项

实验操作细节

实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。例如,在步骤3中加入蒸馏水时要逆时针方向搅拌,缓慢加入。严格按照实验步骤操作,注意玻璃棒的使用方法,确保实验成功。

实验材料的选择

选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等,可以提高实验成功率。选择合适的实验材料是实验成功的关键,高DNA含量的材料可以减少实验难度。

实验安全与防护

在实验中使用二苯胺试剂时,要注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。实验过程中要注意安全防护,避免有毒试剂对身体的伤害。

DNA的粗提取与鉴定实验通过简单的操作步骤,成功地提取并鉴定了DNA。实验原理基于DNA的溶解度和与细胞内其他成分的分离,实验步骤包括制备鸡血细胞液、提取细胞核物质、溶解DNA、析出DNA、过滤和再溶解以及DNA的鉴定。实验结果通过颜色变化和纯度分析进行确认,实验过程中需注意操作细节、材料选择和实验安全防护。

点击查看完整版
提示:本内容不能代替面诊,如有不适请尽快就医。
大家都在搜
相关推荐

西安亲子鉴定正规机构

在西安,有许多正规的亲子鉴定机构可供选择。以下是一些主要的正规亲子鉴定机构及其相关信息: 1.西安国医基因亲子鉴定中心地址:西安市新城区自强东路1118号服务范围:新城区、碑林区、莲湖区、雁塔区、灞桥区、未央区、阎良区、临潼区、长安区、高陵区、鄠邑区、蓝田县、周至县、高新区、西咸新区及周边城市地区咨询范围:上户口亲子鉴定、个人亲子鉴定、司法亲子鉴定、移民亲子鉴定、入户亲子鉴定、中考亲子鉴定

健康新闻 2025-03-30

西安市司法鉴定中心收费标准

西安市司法鉴定中心的收费标准主要依据国家和地方的相关法律法规,并结合地方实际情况进行制定。以下是关于西安市司法鉴定中心收费标准的详细信息。 司法鉴定收费管理办法 收费原则 ​公开公平 :司法鉴定收费应遵循公开、公平、诚实信用、平等有偿和委托人付费的原则。 ​政府指导价 :法医、物证、声像资料类司法鉴定收费实行政府指导价或政府定价管理。 收费项目 涉及财产案件的司法鉴定收费

健康新闻 2025-03-30
西安市司法鉴定中心收费标准

天然气微信缴费的步骤

微信缴费已经成为越来越多人的首选,以下是详细的天然气微信缴费步骤和相关注意事项。 基础缴费流程 进入缴费入口 打开微信,点击右下角的“我”→“服务”或“支付”→“生活缴费”。微信提供了多种进入缴费入口的方式,确保用户可以方便地找到并使用这一功能。 选择燃气缴费项目 在生活缴费页面点击“燃气费”,系统会自动定位当前城市(若定位错误需手动调整)。自动定位功能简化了操作步骤

健康新闻 2025-03-30
天然气微信缴费的步骤

医保检查化验报销目录

医保检查化验报销目录主要包含在基本医疗保险的 诊疗项目目录 中,具体报销规则如下: 一、报销范围 常规检查项目 包括血常规、尿常规、心电图、X光、CT、MRI、彩超、DR等临床必需的诊疗项目。 特殊检查项目 如胃镜、结肠镜、动态心电图、支气管镜检查等。 门诊慢性病相关检查 例如高血压、糖尿病患者的定期监测项目。 二、报销比例与限制 地区差异 报销比例因地区政策不同而有所差异

健康新闻 2025-03-30

2025年贵州六盘水治疗晨起恶心的医院有哪些

根据搜索材料,以下是2025年贵州六盘水治疗晨起恶心的相关医院信息: 六盘水市人民医院 六盘水市人民医院是一家三级甲等医院,地址位于六盘水市钟山西路56号。该医院设有多个科室,包括内科、呼吸内科、消化内科、神经内科等 六盘水凉园妇产医院 六盘水凉园妇产医院是一家专注于妇产科疾病的医院,地址和联系方式未在搜索材料中明确提及。该医院在处理怀孕相关症状方面具有专业经验,包括晨起恶心等早孕反应 其他建议

健康新闻 2025-03-30

西安最有权威的司法鉴定中心

西安交通大学法医学司法鉴定中心 根据搜索结果,西安最具权威性的司法鉴定中心为 西安交通大学法医学司法鉴定中心 ,其权威性主要体现在以下方面: 权威资质 该中心是陕西省重点建设的高水平司法鉴定机构,由司法部备案且高级人民法院对外公示,是陕西省规模最大、实力最强的司法鉴定机构。 业务范围 覆盖法医学临床、法医物证、文书、痕迹、声像资料、司法会计、法医病理、知识产权、建筑工程造价、资产评估、知识产权

健康新闻 2025-03-30

西安伤情司法鉴定中心排名

在西安市,有多家司法鉴定机构提供伤情鉴定服务。这些机构根据其专业领域、服务质量以及客户评价等因素,在公众中享有不同的声誉。直接的“排名”信息并不常见,因为每个机构都有其专长和服务特色。下面列举一些在西安市较为知名的司法鉴定中心,并简要介绍它们的特点和位置。 西安交通大学法医学司法鉴定中心 :位于陕西省西安市雁塔西路76号,该中心依托于西安交通大学法医学科的强大背景

健康新闻 2025-03-30

西安dna亲子鉴定需要多少钱

西安DNA亲子鉴定费用根据类型和机构不同有所差异,具体如下: 一、常见类型及费用 ‌个人隐私亲子鉴定 ‌ 费用范围:2000-2600元‌ 特点:匿名办理,支持邮寄样本,结果仅供个人参考,无法律效力。 ‌司法亲子鉴定 ‌ 费用范围:2400-3600元‌ 单亲(父/母+子):约2400元‌ 双亲(父母+子):约3600元‌ 特点:需现场采样并验证身份,结果具法律效力,适用于落户、诉讼等场景。

健康新闻 2025-03-30

鞋子第三方鉴定机构怎么收费

鞋子的第三方鉴定机构收费情况如下: 质检报告费用 : 质检报告一份的费用在500-1200元不等,一般4-5个工作日即可出报告。全套的测试需要提供2双鞋子(38码及以上),如果检测项目较少,提供一双即可。 电商平台入驻检测 : 在一些电商平台入驻时,鞋类产品的检测报告费用大约在1000元左右,具体价格看检测的鞋类及相关需要检测的项目标准,项目越多,价格也会相应提高。 线上鉴别费用 :

健康新闻 2025-03-30

工程质量鉴定第三方机构收费标准

工程质量鉴定第三方机构的收费标准通常根据项目的具体情况、规模、复杂程度等因素来确定。以下是一些常见的收费标准和相关信息: 1.房屋质量鉴定收费标准:一类房屋鉴定:每平方米2.7元(≤200平方米500元)二类房屋鉴定:每平方米2.25元(≤200平方米400元)三类房屋鉴定:每平方米1.8元(≤60平方米300元)非住宅房屋安全鉴定:可在上述标准基础上上浮20% 2.工程造价鉴定收费标准

健康新闻 2025-03-30

dna的粗提取与鉴定在什么冰箱

DNA的粗提取与鉴定过程中,样品的保存和处理通常需要在不同温度的冰箱中进行。以下是一些常见的保存和处理方法: 1.短期保存:提取的DNA通常可以溶解在无菌水或TE缓冲液中,并置于4℃的冰箱中保存。这种方法可以使DNA在一周内保持稳定 2.长期保存:为了长期保存DNA,建议将其存储在-20℃的冰箱中。在这种低温下,DNA的降解速度显著减缓

健康新闻 2025-03-30

生物选修一dna的粗提取与鉴定

生物选修一中的DNA的粗提取与鉴定实验是生物学学习中一个非常重要的实践环节。该实验不仅帮助学生理解DNA的基本物理化学性质,还提供了动手操作的机会,让学生能够亲身体验从细胞中提取DNA的过程。以下是关于这一主题的详细介绍。 实验原理 DNA是一种大分子核酸,其在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度有所不同。当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。DNA不溶于酒精

健康新闻 2025-03-30

dna的粗提取与鉴定选材要求

含DNA量高、易获取、易操作 DNA的粗提取与鉴定实验对材料的选择有明确要求,需综合考虑以下因素: 一、材料选择原则 DNA含量高 优先选用DNA含量丰富的生物组织,如鸡血、猪肝、菜花等。哺乳动物成熟的红细胞(如鸡血细胞)因无细胞核,需通过添加抗凝剂(柠檬酸钠)并去除血浆后提取。 易获取与成本效益 选择常见且易获取的材料,如鸡血、菜花等,以降低实验成本并节省时间。 操作简便性 材料需适合快速处理

健康新闻 2025-03-30

dna粗提取与鉴定实验知识点

DNA粗提取与鉴定实验是生物学实验中的一个经典课题,通过这一实验,学生可以深入了解DNA的物理和化学性质,并掌握基本的分子生物学实验技术。以下是关于DNA粗提取与鉴定实验的详细知识点。 实验原理 DNA的溶解度 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。在0.14mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低,而在2mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最高。利用这一特性

健康新闻 2025-03-30
dna粗提取与鉴定实验知识点

质粒dna提取及电泳检测实验报告

质粒DNA提取及电泳检测实验报告 一、实验目的 1.学习并掌握质粒DNA的提取方法。 2.掌握琼脂糖凝胶电泳技术,用于检测质粒DNA的纯度和浓度。 3.了解质粒DNA在基因克隆和分子生物学研究中的应用。 二、实验原理 质粒是细菌细胞中独立于染色体DNA之外的环状双链DNA分子。质粒DNA的提取通常采用碱裂解法,该方法利用碱性溶液使细胞裂解,释放出质粒DNA,并通过离心和沉淀等步骤纯化DNA

健康新闻 2025-03-30

把dna粗提取与鉴定实验原理和步骤

DNA粗提取与鉴定实验原理与步骤 ‌一、实验原理 ‌ ‌溶解性差异 ‌ DNA在 ‌2 mol/L NaCl溶液 ‌ 中溶解度较高,但 ‌不溶于酒精 ‌‌。 在 ‌0.14 mol/L NaCl溶液 ‌ 中,DNA溶解度最低,可析出沉淀;而部分蛋白质仍保持溶解状态‌。 ‌分离与纯化 ‌ 利用 ‌酒精(体积分数95%) ‌ 去除可溶性蛋白质(如蛋白酶、脂质等),因DNA不溶于酒精‌。

健康新闻 2025-03-30

dna粗提取与鉴定实验结果

丝状物出现,沸水浴后呈蓝色 关于DNA粗提取与鉴定的实验结果,综合多个实验报告和操作要点,主要结果及分析如下: 一、粗提取结果 DNA析出形态 通过研磨、过滤、酒精沉淀等步骤,可观察到白色丝状物或粘稠物析出,这是DNA的特征性产物。例如: 使用鸡血提取时,加入95%酒精后静置2-3分钟出现白色纤维状物; 用研磨液提取洋葱时,过滤后上清液加入酒精也能观察到类似现象。 提取效率影响因素

健康新闻 2025-03-30

dna粗提取与鉴定实验研磨液的作用

在DNA粗提取与鉴定实验中,研磨液的作用至关重要。它不仅能帮助破碎细胞膜,释放DNA,还能通过特定的化学成分保护DNA,防止其降解。以下将详细介绍研磨液的主要成分及其在实验中的作用。 研磨液的主要成分及其作用 Tris-HCl缓冲液 Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种碱性生物缓冲剂,主要作用是稳定溶液的pH值,防止DNA在pH变化时降解或变性。pH值的稳定性对于DNA的完整性和提取效率至关重要

健康新闻 2025-03-30
dna粗提取与鉴定实验研磨液的作用

dna的粗提取与鉴定实验步骤是什么

DNA的粗提取与鉴定实验是一个经典的生物学实验,它展示了如何从生物材料中分离出DNA,并通过特定化学反应来验证其存在。以下是详细的实验步骤: 实验材料和试剂准备 实验材料 :可以选用新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花或猪肝等含有较高DNA含量的生物组织。 试剂 : 研磨液(包含NaCl、EDTA、SDS、Tris和HCl) 蒸馏水 氯化钠溶液(如2mol/L NaCl溶液) 预冷的95%酒精 二苯胺试剂

健康新闻 2025-03-30

做dna亲子鉴定需要本人同意吗

根据搜索材料和相关法律规定,做DNA亲子鉴定是否需要本人同意,取决于具体的鉴定类型和情况。以下是详细的解释: 1.个人亲子鉴定:不需要本人同意:个人亲子鉴定主要用于个人私下确认亲子关系,不涉及法律用途。在这种情况下,委托人(通常是父母中的一方)可以自行采集样本并匿名送检,无需其他被鉴定人(如孩子或另一方父母)的同意结果不具备法律效力:这种鉴定的结果仅供个人参考,不能作为法律证明 2

健康新闻 2025-03-30
首页 顶部