空气沉降菌检测是评估洁净环境中微生物污染程度的重要方法，广泛应用于医药、食品、电子等多个行业。以下是空气沉降菌检测的最新标准和方法：
1. 检测方法
空气沉降菌检测主要采用自然沉降法，通过空气中的微生物粒子自然沉降在培养基平皿上，然后在适宜的条件下培养，使其繁殖到可见的菌落数
2. 检测条件
- 温度和湿度：洁净室（区）的温度应控制在18℃-28℃，相对湿度应控制在45%-65%之间
- 压差：不同洁净度级别的洁净室（区）之间的压差应大于5Pa，以保持相对正压
3. 检测步骤
- 1.准备阶段：确保洁净室（区）的空调净化系统正常运行至少24小时，并进行消毒灭菌。每5-10平方米设置一个测定点，将培养皿放置在地面上或0.8米高度处。
- 2.采样方法：将已制备好的培养皿按采样点布置图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基面暴露30分钟（静态测试）或3小时（动态测试）采样结束后，将培养皿盖盖上并倒置
- 3.培养阶段：将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。常用的培养条件为：大豆酪蛋白琼脂平板（TSA）：30℃-35℃培养不少于48小时沙氏培养基（SDA）平板：20℃-25℃培养不少于5天
- 4.菌落计数：用肉眼直接计数培养皿上的菌落数，并用5-10倍放大镜检查是否有遗漏。若有菌落重叠，可分辨时仍以多个菌落计数
4. 检测标准
根据国家标准GB/T 16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》，不同洁净度级别的洁净室（区）沉降菌数量应符合以下标准
- Ⅰ级：沉降菌数量不超过1 CFU/平方米·小时。
- Ⅱ级：沉降菌数量不超过5 CFU/平方米·小时。
- Ⅲ级：沉降菌数量不超过10 CFU/平方米·小时。
- Ⅳ级：沉降菌数量不超过20 CFU/平方米·小时。
5. 注意事项
- 防止污染：采样前应关闭门窗，静止10分钟，采样高度为距地面0.8-1.5米。
- 对照试验：每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染
- 记录和鉴别：详细记录培养基、培养条件及其他参数，必要时用显微镜鉴别细菌菌落与培养基沉淀物
6. 食品车间特殊要求
对于食品车间，沉降菌检测还需考虑以下因素：
- 霉菌控制：霉菌具有高抗性，需使用高效的消毒剂，如奥克泰士等
- 消毒策略：采用空气喷雾雾化消毒结合常规臭氧紫外线消毒，并根据内控标准设定消毒频率
7. 内控标准
食品生产企业应根据国家法规和行业标准，结合自身实际情况，制定严格的空气沉降菌内控标准。例如，粉状婴幼儿配方食品的沉降菌限值为≤100 CFU/4小时，至少每周监控一次
通过以上标准和方法的实施，可以有效评估和控制洁净环境中的微生物污染，确保生产环境的卫生安全。